人体带绦虫病诊断方法的研究进展

 

目前用于人体带绦虫感染或寄生的常用临床诊断方法有虫体形态学观察、粪便或肛门拭子涂片显微镜检查、循环抗体ELISA检测、粪抗原 ELISA和粪DNA-PCR检测等。敏感性高且特异性强的粪抗原 ELISA和粪DNA分子生物学检测是今后的发展方向和应重点研究的领域。以下介绍酶电泳法、抗原 ELISA和DNA分子生物学检测。

用酶电泳法分析包括感染人体猪带绦虫和牛带绦虫在内的多种带科绦虫腺苷酸激酶(AK)、谷氨酸脱氢酶( GLDH)、己糖激酶(HK)、苹果酸脱氢酶( MDH)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)同工酶等酶活性来鉴定和鉴别带绦虫虫种,表明不同种之间这些酶活性或同工酶酶谱存在差异,可用于绦虫虫种鉴定,其中 GPI同工酶酶谱电泳分析技术比染色法快而且简单,尤其适用于不能直接用形态学观察法鉴定和区别虫体样本的情况。

通过对人和动物粪便虫体抗原的检测来诊断绦虫感染的免疫学方法已逐渐用于临床诊断和流行病学调查。其原理是虫体寄生于宿主小肠内,其代谢物、分泌物、节片、虫卵等虫体组织(统称粪抗原)可随宿主粪便排到体外;再利用抗原-抗体特异结合的原理,通过制备特异抗体来检测粪抗原。分子生物学(粪虫体 DNA)检查方法

分子生物学试验方法主要包括 DNA探针杂交技术、限制性酶切片段长度多态性( RFLP )、聚合酶链反应 ( PCR ) 、RFLPPCR、随机扩增片段长度多态性-PCR(RAPDPCR)、单链构象多态性(SSCP)、多重 PCR、巢式PCR、核苷酸序列测定等。Yamasaki等和Anantaphruti等应用碱基切除序列扫描胸腺嘧啶核苷阅读分析[base exc-ision sequence scanning thymine-base ( BESS Tbase)reader analysis]方法,通过对co1和细胞色素氧化酶b基因( cob)片段中特定位点上的胸腺嘧啶核苷酸碱基( T)的扫描可准确鉴别出这 3种带绦虫,并可对猪带绦虫的两种基因型作出鉴别。